病毒的检查
  ● 标本的采集与送检
 
  ○ 部位
 
 Site of viral infection  Site of specimen collection
 上呼吸道  鼻烟部分泌物
 下呼吸道
 痰液
 中枢神经系统  脑脊液
 胃肠道
 粪便
○ 时间
○ 送检
○ 血清
 - 双份血清
  ● 病毒的分离培养
 
  ○ 动物接种
  - 优点:症状、体症与人相似
- 缺点:可能有干扰问题
    个体之间有差异
    有些病毒无敏感的动物
○ 鸡胚接种
  Embryonated eggs inoculation
- 优点:操作简单、成本低
    来源较容易
    带病毒少
- 缺点:很多病毒不敏感,分离不出来
○ 组织培养
 

- 体外培养离体的组织块或活的细胞
- 种类
 。器官培养
 。移植培养
 。细胞培养 :原代和次代细胞培养 二倍体细胞株 传代细胞系

○ 病毒感染的鉴定
 
- 病毒在细胞内增殖的检测
- 病毒感染性的鉴定
-   CPE: Cytopathological effect 多数病毒在细胞内增殖,可引起细胞形态学异常改变如细胞变圆、肿胀、坏死、脱落等
CPE:

CPE:

Inclusion body of CMV:
-   包涵体:感染的细胞胞浆或胞核内出现嗜酸性或嗜碱性的圆形、椭圆形或不规则形状的团块结构
  ● 病毒感染的鉴定
 
  ○ 病毒在细胞内增殖的检测
○ 病毒感染性的鉴定
TCID50 ID50
  - 组织感染剂量:能使50%组织培养细胞感染病变(CPE)的最小剂量
- 50%的感染剂量:引起50%的动物或鸡胚发病死亡的感染剂量
PFU(空斑形成单位)
  ● 病毒的诊断
 
  ○ 光镜—包涵体
○ 电镜检查
  - 直接检查法
- 免疫电镜检查法

Immunofluorescence
○ 检测病毒抗原及抗体
  - 直接检测抗原
- 检测血清中的抗体
 。血凝抑制试验
Hemagglutination inhibition test:
○ 检测病毒核酸的方法
  - 病毒核酸杂交技术
- PCR
Mechanisms of Polymerase chain reaction (PCR):
 
抗病毒治疗
  ● 抑制病毒复制
  ● 提高机体的免疫应答
  ● 抑制病毒基因复制、转录及转译
 
抗病毒药物与制剂
  ● 核苷类药物
  ● 病毒蛋白酶的抑制物
  ● 干扰素、中草药等
  ● 抗病毒基因治疗
  ● 免疫制剂
 
病毒感染的预防
  ● 疫苗
  ○ 减毒活疫苗
○ 灭活疫苗
○ 基因工程疫苗
○ 核酸疫苗
  ● 减毒活疫苗 e.g., Sabin vaccine
  ● 灭活疫苗 e.g., Salk vaccine
  减毒活疫苗与灭活疫苗的比较
 
 区别要点
 减毒活疫苗  灭活疫苗
 途径
 自然途径或注射  注射
 接种剂量  小  大
 接种次数
 一次
 较多
 抗体反应
 IgG, secretory IgA  IgG, serum IgA
 干扰现象
 有
 无
 副反应
 轻微或无  注射局部和全身反应较重
 免疫持续时间  数年
 较短