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补体结合实验和补体测定>> 补体组分检测 |
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检测补体经典激活途径常用指标为CH50、C2、C3、C4测定,其中阳性率最高的是C4活性测定,其次为C4定量。检测旁路激活途径常用指标为ACH50、B因子(BF)、P因子,以BF活性阳性率最高。补体活性与含量的测定不能相互取代,以两者同测综合分析为佳。本节主要介绍单向琼脂扩散法测定C3含量。
在含有抗C3血清的琼脂板上打孔,加入待检样品,样品中C3向四周扩散,与琼脂中相应抗体结合,形成白色沉淀环,环的直径与C3浓度呈正相关。用C3标准品制作标准曲线,根据待检样品孔的沉淀环直径,即可测出其中C3含量。
制备抗C3琼脂凝胶板。打孔,加样(C3标准品和待检血清),孵育一定时间,使样品中C3充分和凝胶中抗C3反应,形成沉淀环。测量沉淀环直径,以沉淀环直径为纵坐标,C3标准品含量为横坐标(对数坐标),绘制标准曲线,在标准曲线上查出待检C3含量。
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