|
|
|
| 您的位置是>> 首页 >> 特异性抗体的制备与鉴定>>
单克隆抗体制备技术>> 单克隆抗体的特性、优点、和局限性 |
| |
1．单克隆抗体的特性
1）高特异性：由于单克隆抗体只针对一个抗原决定簇，而一个抗原决定簇又很小，一般只有4～7个氨基酸，故单克隆抗体发生交叉反应的机会很少，即其特异性高。但这种专一性也不是绝对的。在相似的抗原之间，其特异性具有浓度的依赖性，即当抗体的浓度达到一定的程度后，其特异性可有所降低。
2）高度的均一性和可重复性：由于单克隆抗体是由单个细胞株产生的，所以其分泌的抗体是均一的，而且只要长期的保持杂交瘤细胞的稳定性，不发生突变，就可以长期获得同质的单克隆抗体。
3）单克隆抗体仅具有单一的生物功能。
4）除非抗原上有较多的同一抗原决定簇，一般单克隆抗体与抗原反应不呈现沉淀反应。这是由于抗单一抗原决定簇不易形成三维晶格结构之故。
5）由于单克隆抗体对细胞的凝集作用较多克隆抗体弱，所以单克隆抗体的细胞毒作用也较弱。其细胞毒作用不仅取决于单克隆抗体的种类，而且取决于抗原决定簇在细胞表面的分布。两种或两种以上的单克隆抗体可使细胞表面的抗原决定簇集中，并使其细胞毒的作用加强。
6）单克隆抗体对环境敏感。单克隆抗体易受环境的pH、温度和盐类浓度的影响，使其活性降低甚至丧失，但单克隆抗体遇热后的聚合作用很低。已证明560C、5分钟可使单克隆抗体失活，小鼠血清可能有一定的保护作用，两种单克隆抗体的混合物也可使其耐热性加强。总之，单克隆抗体越纯对热越敏感，而杂蛋白及其他抗体分子可使单克隆抗体的耐热性增强。单克隆抗体受pH的影响较多克隆抗体明显，其最佳的pH为6～8，而且抗体越纯对pH越敏感。低浓度的NaCl对单克隆抗体可能有一定的保护作用。
7）单克隆抗体用于免疫酶染色、免疫荧光分析、放射免疫分析、以及酶联免疫吸附分析时，其反应强度不如多克隆抗体，但其特异性较多克隆抗体好。此外，应用单克隆抗体时，对抗原的保存要求也更加严格。如某些固定方法可使抗原的特定抗原决定簇失去抗原性，就会产生阴性结果。
2．单克隆抗体与多克隆抗体的比较：单克隆抗体与多克隆抗体的比较如表4 -5。
表4 -5 单克隆抗体与多克隆抗体的比较
3．单克隆抗体的优点与局限性：单克隆抗体和多克隆抗体各有其优点和局限性，只有对它们有全面的了解，才能根据不同应用领域的要求，正确的选择和应用。
1）单克隆抗体的优点：
（1）杂交瘤可以在体外“永久”地存活并传代，只要不发生细胞株的基因突变，就可以不断的生产高特异性、高均一性的抗体。
（2）可以用相对不纯的抗原，获得大量高度特异的、均一的抗体。
（3）由于可能得到“无限量”的均一性抗体，所以适用于以标记抗体为特点的免疫学分析方法，如IRMA和ELISA等。
（4）由于单克隆抗体的高特异性和单一生物学功能，可用于体内的放射免疫显像和免疫导向治疗。
2）单克隆抗体的局限性：
(1）单克隆抗体固定的亲和性和局限的生物活性限制了它的应用范围。由于单克隆抗体不能进行沉淀和凝集反应，所以很多检测方法不能用单克隆抗体完成。、
(2)单克隆抗体的反应强度不如多克隆抗体。
（3）制备技术复杂，而且费时费工，所以单克隆抗体的价格也较高。
|
|
|
|
| |
