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根据反应原理，ELISA技术可分为以下基本反应类型：
1．双抗体夹心法
原理：将已知抗体包被微量反应板，和待检抗原反应，再加酶标抗体和底物，根据显色反应对抗原进行定性和定量。
1） 将特异性抗体与固相载体连接，形成固相抗体，随后再用某种蛋白质封闭空白位点。
2） 加待检标本（Ag），该抗原将与固相抗体发生特异性结合，其他未结合物质经洗后除去
3） 加酶标记抗体，酶标抗体和待检抗原发生反应形成固相抗体-待检抗原-酶标抗体的夹心复合物。游离的标记抗体经洗涤除去。
4） 加底物显色,通过颜色的深浅,计算标本中抗原的含量。
备注：双抗体夹心法是检测抗原的最常用的方法,主要适于大分子抗原。测定中受血清中类风湿因子的干扰。
2．间接法
原理：标本中的待检抗体与固相抗原结合后，利用酶标抗抗体进行检测。
1）将已知抗原包被固相载体，形成固相抗原。封闭其余空白位点。
2）加待检血清（Ab）,待检抗体与固相抗原发生特异性结合，经洗涤除去其他未结合成分。
3）加酶标抗抗体，反应后形成固相抗原-待检抗体-酶标抗抗体的复和物。游离的标记抗体经洗涤除去。
4）加底物显色，通过颜色深浅对待检抗体进行定量。
备注：间接法主要用于抗体的检测，优点是酶标抗体具有通用性。
3． 竟争法 竞争法既可以测定抗原，也可测定抗体。以测定抗原为例：
原理：将待检抗原和标记抗原与固相抗体竞争结合，标本中的抗原越多，与固相结合的酶标抗原越少，与底物反应后生成的颜色越浅，因此，可根据颜色进行定量。
1） 包被特异性抗体，形成固相抗体，封闭其余空白位点。
2） 加入待检抗原和酶标抗原，抗原和酶标抗原竞争结合固相抗体，经洗涤除去其他未结合成分。
3） 加底物显色，通过颜色深浅对待检抗体进行定量。
备注：竞争法主要用于一些小分子抗原或半抗原的测定，由于标记抗原不如标记抗体容易，近年来，本方法也作了重大改进。
1）固相抗原，待测抗原和固相抗原竞争游离的标记抗体。
2）固相抗原，使标记抗体和待检抗体共同竞争固相抗原。
4．双位点一步法
原理：应用识别抗原不同位点的单克隆抗体做双抗体夹心法测定。包被一种抗体后，同时加入待检抗原和另一种抗体的标记物，待检抗原上的两个抗原决定簇同时与固相抗体和酶标抗体反应，形成固相抗体-待检抗原-酶标抗体的夹心复合物。加底物显色，通过颜色深浅对待检抗原进行定量。
1） 将一种单克隆抗体与固相载体连接，形成固相抗体，随后再用某种蛋白质封闭空白位点。
2） 加待检标本（Ag）和另一种酶标单克隆抗体，该抗原将同时与二者发生特异性结合，形成固相抗体-待检抗原-酶标抗体的夹心复合物，其他未结合物质经洗液除去。（由于固相抗体和酶标抗体为识别同一抗原分子上不同的抗原决定基，两种抗体之间不会形成竞争。）
3） 加底物显色,通过颜色的深浅,计算标本中抗原的含量
备注：一步法省时、简便、特异性高。有时可出现倒钩现象（hook effect）。一步法要求两种单克隆抗体所识别的抗原位点应相距一定距离，以确保两种反应不相互干扰。因此，该方法使用的两种抗体应进行选择。
5．捕获法检测IgM类抗体
原理：将抗人IgM抗体连接在固相载体上，以此捕获血清中的所有的IgM类抗体，然后在通过特异性抗原识别特异性的IgM类抗体，最后通过酶标记的特异性抗体显色，从而检测到针对某一抗原的IgM类抗体。
1）将抗人IgM抗体连接在固相载体上，形成固相抗人IgM。随后再用某种蛋白质封闭空白位点。
2）加稀释的病人血清标本,反应后血清中的IgM抗体被固相抗体捕获.洗涤除去其他未结合的血清成分。
4） 加特异性的抗原试剂，它只与固相上的特异性IgM结合，洗涤。
5） 加入针对特异性抗原的酶标抗体，使之与固相上的抗原发生结合，经洗涤除去未结合的酶标抗体。
6） 加底物显色,通过颜色的深浅,计算标本中特异性ＩgM的含量。
备注：本法主要是用于检测病原微生物的IgM类抗体，以判断该种是属于初次感染还是再次感染。
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