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其他酶免疫技术>> 斑点—酶联免疫吸附试验 |
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原理：用吸附蛋白质能力很强的硝酸纤维素膜(NC膜)为固相载体，在NC膜上用铅笔画成5mmX5mm的小方格，将少量抗原(1～2μl)点加于小格中央，干燥后经封闭液处理，滴加待测血清和酶标抗抗体(间接法测抗体)；或将少量待测血清(2～5μl)点加于小格中央，干燥后经封闭液处理，滴加特异性抗原和酶标抗体(夹心法测抗体)；或将特异性抗体(1～2μl)包被NC膜上，滴加待测血清和酶标抗体(双抗体夹心法测抗原)；或直接用待检血清包被NC膜，滴加酶标抗体(直接法测抗原)进行反应。洗涤后滴加能形成不溶性有色沉淀物的底物(HRP常用DAB)。如在NC膜上出现肉眼可见的染色斑点，即为阳性反应。
优点：
①特异性强，假阳性少；
②敏感性高，比ELISA约高6—8倍；
③NC膜对蛋白质的吸附性能比聚苯乙烯强；
④试剂用量少；
⑤操作简便快速，不需特殊设备；
⑥抗原膜保存期长，-20℃可保存半年，其活性不受影响；
⑦检测结果可长期保存，便于复查。
因此很适合基层单位使用。但不能作定量测定。
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