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发光酶免疫测定>> 技术要点 |
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1. 抗原抗体结合反应 将已包被了抗体的乳胶微粒和待测标本加入反应杯中，经温育一定时间后,再加入碱性磷酸酶标记抗体，温育一定时间后,形成固相包被抗体-抗原-酶标抗体复合物。
2. 结合和游离部分分离 将复合物转移到玻璃纤维上，用缓冲液洗涤，没结合的抗原、被洗涤下去，酶标抗体-抗原-胶乳微粒抗体复合物则被保留在纤维膜上。
3. 酶促发光反应 加入底物4-MUP，酶标抗体上ALP将4-MUP分解，脱磷酸根基团后形成4-甲基伞形酮（4-MU），它在360nm激发光的照射下，发出448nm的荧光，经荧光读数仪记录，放大，最后根据标准曲线由电脑计算出所测物质的含量。
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