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淋巴细胞数量检测>> B细胞数量的检测 |
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1.直接荧光免疫技术检测sIg
1)原理 sIg 是B细胞表面特有的标志,通过荧光素标记的抗Ig直接和淋巴细胞反应,在荧光显微镜下呈现特异性荧光的细胞为sIg阳性细胞。通过对该种标志的检测可对B细胞进行鉴定和检测。
2)技术要点 制备一定浓度的PBMC,与适当稀释的FITC标记抗人Ig结合,孵育,洗涤。在荧光显微镜下观察,呈现黄绿色荧光的淋巴细胞为sIg阳性细胞。
3)方法评价直接荧光法是检测B细胞sIg的常用方法之一,缺点是标本不宜长期保存,需要荧光显微镜才能观察结果。正常人外周血中B细胞占淋巴细胞总数的12%~30%。
2.应用间接荧光免疫技术检测B细胞特异性的分化抗原
B细胞表面的分化抗原有CD19和CD20,因此可通过检测其中一个标志反应B细胞的数量。
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