第三节 细菌形态与结构检查法

主要内容

• 显微镜放大法
• 染色法
• 意义

显微镜放大法

　　细菌形体微小，肉眼无法看到，而显微镜是观察细菌的得力工具。按照波长的不同，显微镜主要分为光学显微镜和电子显微镜两大类。

• 光学显微镜：
  
  　　以可见光为光源，分辨率达0.25微米。一般细菌都大于0.25微米，故可用光学显微镜进行观察。利用油镜，不仅可清晰地观察到细菌的形态和排列方式，对于荚膜、鞭毛、芽胞等特殊结构经特殊染色也可进行清晰观察。根据观察对象及目的的不同，目前光学显微镜有普通光学显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜、荧光显微镜等多种。
  
  
  
• 电子显微镜：
  
  　　以电子流代替可见光，以电磁圈代替放大透镜。电子显微镜的放大倍数可达数十万倍，能分辨至1nm的微粒。电子显微镜不仅可观察到细菌的内部超微结构，对于光学显微镜无能为力的个体更小的病毒也可获得清晰影像。当前使用的电子显微镜有两类，即透射电子显微镜和扫描电子显微镜。
  
  

染色法

　　细菌是半透明个体，经染色后才可观察较清楚。染色法有多种，有单染法和复染法之分。单染法是用单一一种染色剂进行染色，其结果可将所有菌体染成单一颜色，用以观察细菌的大小、形态和排布。复染法则使用两种或两种以上染色剂，结果可因细菌的不同特性染成不同颜色，从而进行细菌的初步鉴别，因此复染法又称为鉴别染色法。
　　目前最常用、最重要的鉴别染色法是革兰染色法（Gram stain）。该法是丹麦细菌学家革兰（Hans Christian Gram）于1884年创建，至今仍在广泛应用。细菌因此可分为两大类，革兰阳性菌和革兰阴性菌。

方法：

　　 初染：结晶紫；媒染：碘液；脱色：95%乙醇；复染：沙黄。
　　原理：与细菌细胞壁结构密切相关。因革兰阳性菌细胞壁富含肽聚糖结构，可有效保留结晶紫与碘液形成的复合物于细胞内部，从而显示紫色；而革兰阴性菌仅含少量肽聚糖，且于细胞壁最外层为脂质丰富的外膜结构，故而可被脂溶剂乙醇脱色，而显示复染剂沙黄的红色。

意义

• 鉴别细菌
• 选择抗菌药物研究
• 细菌致病性
• 研究细菌抗原性