第二节
主要致病性衣原体
主要内容
沙眼衣原体
沙眼衣原体除少数菌株来自小鼠外,人类是其主要自然宿主。根据致病力和某些生物学特性的差别,沙眼衣原体可分为三个亚种,即沙眼生物亚种、性病淋巴肉芽肿亚种和鼠亚种。
(一) 沙眼亚种
生物学特性
圆形或椭圆形,不同发育阶段,大小和染色反应不一。原体直径约0.3μm,中央有致密核质,Giemsa染色呈紫红色。网状体直径0.5~1μm,核质分散,
Giemsa染色为深蓝或暗紫色。
我国学者汤飞凡(1897~1958)在1955年采用鸡胚卵黄囊接种法在世界上首次分离培养出沙眼衣原体,他是世界上发现重要病原体的第一个中国人,开创了沙眼衣原体的实验研究工作。现可采用多种传代细胞对沙眼衣原体进行培养。
采用微量免疫荧光法(MIF)可将沙眼衣原体至少分为18个血清型,其中沙眼生物变种包括A、B、Ba、C、D、Da、E、F、G、H、I、Ia、J和K共14个血清型。
LGV生物变种包括L1、L2、L2a和L34个血清型。
致病性与免疫性
沙眼亚种主要寄生在人类,无动物储存宿主。主要引起以下疾病:
1.沙眼 由沙眼亚种A、B、Ba和C血清型引起。主要通过眼一眼或眼一手一眼的途径进行直接或间接接触传播。沙眼衣原体感染眼结膜上皮细胞后,在其中增殖并在细胞质内形成包涵体,引起局部炎症。沙眼的早期症状是流泪、有粘液脓性分泌物、结膜充血及滤泡增生。后期出现结膜瘢痕、眼睑内翻、倒睫以及角膜血管翳引起的角膜损害,影响视力或致盲,是目前世界上致盲的第一位病因。
2.包涵体结膜炎 由沙眼亚种B、Ba、D、Da、E、F、G、H、I、Ia、J及K血清型引起。包括婴儿及成人两类。前者系婴儿通过产道时感染,引起滤泡性结膜炎,其分泌物内含大量衣原体。病变类似沙眼,但不出现角膜血管翳,不形成结膜瘢痕,一般经数周或数月痊愈。
3.泌道生殖道感染 经性接触传播引起的非淋菌性泌尿生殖道感染,其中有 50%~60%系沙眼衣原体所致,涉及的血清型与包涵体结膜炎的相同。衣原体感染是男性尿道炎最常见的病因,未经治疗者多数转变成慢性,周期性加重,或可合并附睾炎、前列腺炎等。在女性可引起尿道炎、宫颈炎、输卵管炎、盆腔炎等。衣原体常与淋病奈瑟菌混合感染、淋病奈瑟菌对衣原体繁殖起着激活和促进作用。因此在合并淋病奈瑟菌感染者,沙眼衣原体分离阳性率增高。
机体感染沙眼衣原体后,血清中有特异性抗体,但抗体持续时间短暂。沙眼病愈合后机体免疫力不强,易再受感染。
微生物学检查法
1.直接涂片镜检 采用Giemsa、碘液或荧光抗体染色镜检,检查上皮细胞内有无包涵体。
2.分离培养 采用感染组织的刮取物或分泌物,接种鸡胚卵黄囊或传代细胞。衣原体培养较常用的是经放线菌酮处理的单层McCoy细胞,或HeLa-229细胞及BHK21细胞,35℃培养48~72h。用直接免疫荧光法或酶联免疫法可以检测标本中的衣原体。
3.核酸检测 采用多聚酶链反应(PCR)、连接酶链反应(LCR)等核酸扩增技术检测沙眼衣原体,已得到较广泛应用。
(二)性病淋巴肉芽肿亚种
生物学特性
LGV亚种的大小、染色和培养特性均类似沙眼亚种。引起本病的四个血清型(L1、L2、L2a及L3)与沙眼亚种E型和C型有交叉抗原存在。
致病性与免疫性
人是性病淋巴肉芽肿衣原体的自然宿主,无动物储存宿主。主要通过两性接触在人类传播。主要侵犯淋巴组织,在男性侵犯腹股沟淋巴结,引起化脓性淋巴结炎和慢性淋巴肉芽肿,常形成瘘管。在女性侵犯会阴、肛门和直肠,可形成肠皮肤瘘管;也可引起会阴-肛门-直肠狭窄和梗阻。LGV也能引起伴有耳前、颌下及颈部淋巴结肿大的结膜炎。
微生物学检查法
采集淋巴结脓肿、脓液、生殖器溃疡或直肠组织标本待检。LGV标本的保存、运送以及检测方法,与沙眼亚种相同,LGV衣原体容易在传代细胞培养,一般不需要特殊的技术处理。检测血清中抗衣原体抗体的血清学诊断试验,在常规临床诊断中价值不大,此因性传播的高危人群多有慢性感染,不易获得衣原体感染急性期和恢复期双份血清进行抗体水平的比较。
防治原则
沙眼的预防重在注意个人卫生,不使用公共毛巾、浴巾和脸盆,避免直接或间接的接触传染,目前尚无特异的预防方法。治疗药物可选用磺胺、红霉素、诺氟沙星等。
肺炎衣原体
肺炎衣原体是衣原体属中的一个新种。只有一个血清型,即TWAR组衣原体。
生物学特性
其原体结构、DNA序列、培养特性、血清学分析以及致病性与其他衣原体均有不同:
1.TWAR的原体平均直径为0.38μm,在电镜下呈梨形,并有清晰的周浆间隙,原体中无质粒DNA。
2.TWAR株与鹦鹉热衣原体、沙眼衣原体的DNA同源性<10%,而不同来源的 TWAR株都具有94%以上的DNA同源性,其限制性内切酶的图谱相同。
3.TWAR只有一个血清型,外膜蛋白顺序分析完全相同,98kDa蛋白为特异性抗原。其单克隆抗体与沙眼衣原体及鹦鹉热衣原体无交叉反应。
4.TWAR株用HEp-2和HL细胞系较易分离和传代,但在第一代细胞内很少能形成包涵体。
致病性与免疫性
肺炎衣原体寄生于人类,无动物储存宿主。TWAR感染系人与人之间经飞沫或呼吸道分泌物传播,亦可在家庭或医院等集体场所相互传染。TWAR是呼吸道疾病重要的病原体,主要引起青少年急性呼吸道感染,可引起肺炎、支气管炎、咽炎和鼻窦炎等。起病缓慢,临床常表现有咽痛、声音嘶哑等症状,还可引起心包炎、心肌炎和心内膜炎。
微生物学检查法
1.病原学检查 用HL和HEp-2细胞培养肺炎衣原体较易生长,用McCoy细胞及其它传代细胞分离培养肺炎衣原体较困难,痰标本对细胞有毒性作用,通常取咽拭标本或支气管肺泡灌洗液较好。标本最好用膜式滤菌器除去杂菌,不加抗生素。痰液和咽拭均先涂片,再以免疫酶标法或直接免疫荧光法检测肺炎衣原体的存在。
2.抗体测定 目前诊断TWAR感染较敏感的方法,是用微量免疫荧光试验检测血清中的抗体。分别检测TWAR的特异性IgM和IgG抗体,有助于区别近期感染和既往感染,也有利于区别原发感染和再感染;凡双份血清抗体滴度增高4倍或以上;或单份血清IgM抗体滴度≥1:16,或IgG抗体滴度≥1:512,可确定为急性感染。
3.特异性核酸检测 采用限切酶Pst I对TWAR DNA酶切后,可以获得一474bp的核酸片段,这是其它两种衣原体没有的DNA片段。采用扩增DNA的PCR技术,可以进行TWAR特异性核酸片段的检测。
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